Explicación detallada da volatilización de reactivos nos experimentos de PCR

Explicación detallada da volatilización de reactivos en experimentos de PCR.

No experimento de PCR, despois de engadir o sistema de reacción, cubrimos coidadosamente a tapa e confirmamos repetidamente que a tapa está pechada para evitar a volatilización do reactivo. Pero ás veces tamén temos dúbidas: confirmamos que a tapa está ben pechada, pero despois de que o experimento se complete, o reactivo aínda se evaporará. Cal é a razón?

De feito, a volatilización de reactivos é un dos problemas máis comúns nos experimentos de PCR e hai moitos factores que afectan a volatilización de reactivos.

A evaporación refírese a iso durante o experimento de PCR, a solución de reacción evapora a alta temperatura e, a continuación, condensa na parede da botella ou na tapa superior para formar néboa ou pingas de auga ou desbordar directamente da brecha de aire da gorra ou película, resultando nun cambio na concentración da solución de reacción. Os cambios, a cantidade de solución de reacción diminuíu e algúns incluso se evaporaron á sequedad, obtendo experimentos non válidos.

1. Presión de tapa quente, temperatura

Nos experimentos de PCR, normalmente quentamos a tapa para evitar a condensación do vapor de reactivo. A temperatura da tapa quentada normalmente é superior á da solución de reacción para evitar a condensación de vapores.

As tapas de calefacción de ciclos térmicos pódense dividir aproximadamente nos seguintes catro tipos: tapas de calefacción non axustables, tapas de calefacción axustables, tapas de calefacción adaptativas e tapas de calefacción automáticas. A tapa de calefacción axustable presenta compresión axustada ao dedo. Se non se apertou con forza, os reactivos evaporaranse. A evaporación do bordo pódese minimizar aumentando a presión sobre a tapa quentada. Ás veces, o exceso pode pinchar o tubo e torcer o botón. En circunstancias normais, a cuberta de calefacción intelixente eléctrica pode detectar automaticamente os consumibles de diferentes alturas, comprimir automaticamente os consumibles e a presión é uniforme e constante, reducindo así a evaporación e erros manuais e mellorar a precisión experimental e a repetibilidade.

2. Deformación dos consumibles

Para as fugas de vapor, a maioría da xente pensa que a presión da tapa quente non é suficiente. A presión da tapa quente é moi importante, pero iso é só un aspecto. De feito, os consumibles tamén son moi importantes.

As placas de orificio de PCR normalmente están feitas de materiais plásticos, que se expanden e deforman moito despois de ser quentados. A taxa de expansión térmica da base metálica PCR usada para colocar a placa de orificio PCR é extremadamente baixa, e a placa de orificio PCR non pode expandirse normalmente ao longo do plano despois da expansión térmica. O estado abultado fai que a cuberta de calor superior non poida contactar completamente coa superficie da placa de orificio PCR, dando lugar a unha temperatura e presión desigual, provocando a evaporación do reactivo ao bordo da placa do orificio da PCR e afectando o efecto de detección de PCR.

3. Os consumibles non están ben selados

A estanqueidade da tapa térmica e dos consumibles non significa que a tapa do tubo PCR estea ben pechada e a calidade da placa de pozo PCR é desigual. Os consumibles de alta calidade, a superficie da boquilla e a cuberta son suaves e o selo detrás da tapa da caixa é bo, e non é fácil de filtrar. Os consumibles inferiores teñen botes desiguales e liñas radiais, que poden provocar fugas ou incluso secar.

Polo tanto, nos experimentos de PCR, intente escoller consumibles de alta calidade e adecuados. Ao mesmo tempo, o sistema de reacción pódese ampliar para minimizar a influencia da evaporación do sistema na reacción.